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2개의 DNA를 PCR을 이용해 붙이는 방법 (정리용)
게시물ID : science_1428짧은주소 복사하기
작성자 : 동글몽실
추천 : 0
조회수 : 1592회
댓글수 : 1개
등록시간 : 2010/06/05 18:58:27
이 글을 작성하는데 많은 도움을 주신 문피아의 토끼왕님, 우울우울님, 오늘의 유머의 까베리앙님 감사합니다. 공부도중. 햇깔리고 햇깔린 나머지 인터넷에 이런 글을 올렸었습니다. 원래는 PCR 결과라고 적어놓은 것 중에 위에것만 생각하고 이렇게 물어보려고 했습니다. 에.. PCR을 했을 때 4번 유전자?가 3'과 5' 방향이 바뀌게 되잖아요.(상보적인 DNA를 보면 3번 유전자도 방향이 바뀌게 되지요.) 그러면 읽는 방향이 아에 바뀌어버리니깐 만들어지는 단백질 등등도 다를 거라고 생각되는데 어떻게 이 방법이 서로다른 DNA를 합치는 방법이 될 수 있나요. 그런데 말이죠... 질문을 하려고 그리다보니깐 primer 3을 붙여서 만든 DNA와 primer 4를 붙여서 만든 DNA가 가운데 서로 상보적이게 만든 애들을 빼고 같게 나와요... 왜요?! 어째서?!!! 그리고 왜 PCR 결과가 완전한 gene 1과 gene 2의 결합이 아닌거지요? 제가 틀린건가요, 아님 원래 pcr 결과가 이렇게 나오는건가요... 그러나 이건 전제 자체가 잘못된 것이었지요. DNA는 특별한 효소가 없는한(맞,,을걸요?) 5'에서 3' 방향으로 복제가 진행되지만 두 번째 단계에서는 5'에서 3'으로 복제가 진행되다가 3'->5'으로 복제가 진행되거든요. 토끼왕님이 이렇게 답해주셨습니다. 빈 === -->> 3' ---------------------------------빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀 5' 5' 빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀--------------------------------- 3' 빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀빈공간이안먹혀빈공간이안먹 <<-- ==== (빈공간이 안먹혀는 본인이 적은겁니다) ==== : primer ---- : template 이렇게 적어놓으셨는데 이 그림이 제대로 될려면 아래처럼 되어야 합니다. 위에 그림이랑 아래 그림이랑 사실상 같은 내용이지만 사람이 보고 이해하기에는 확 다를수가 있죠.. 3' ---------------------------빈공간이안먹혀빈공<<-- === 5' 5' === -->>빈공간이안먹혀------------------------------- 3' 그래서 저는 다시 물어봤습니다. 요기(nick)는 어떻게 이어붙이나요? 그러자 쌈박하게 답해주셨죠. '리가아제를 이용하면 됩니다.' 으음... 리가아제라.. 저도 DNA를 이어붙이는데 리가아제를 이용한다는건 알아요. 여기서 이상한걸 눈치챘지요. '어엉? 리가아제같은거 사용 안하고도 잘만 되던데.. 그럼 뭘 잘못한것인가?!!' 그래서 아에 primer 1,2를 1,4 strand에 붙는게 아니라 2,3 strand에 붙도록 짜봤어요. 오옷! 뭔가 된거같아! 라는 생각을 했지만 또 잘못되었다는 소리를 들었습니다. 으윽... 이렇게 되면 DNA 복제방향이 3'->5'이 되거든요... 그래서 다시 그려봤어요. 이제 primer 3,4를 붙여서 마구마구 복제해줍니다♡ 완to the 성! 아자! 아뵤! 아싸라비아콜롬비아 삐약삐약! 올레~!! 묵은 체중이 쑤욱 내려가는 느낌. PCR은 이 밖에도 실험할때 고려해야하는게 무지 많다고하지만(어제 본 PCR 책 두께가..ㅎㄷㄷㄷ) 뭐. 일단 이론적으로라도 제대로 알게 되어서 기쁩니다. ;ㅁ; 다..다섯시간이나 걸렸지만. 털썩. OTL 내 시험공부...
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